原核表達的原理是利用基因克隆技術(shù),將外源目的基因,通過構(gòu)建表達載體并導(dǎo)入模式生物中的方法,使其在特定的細胞或原核生物中表達。
原核蛋白表達的一般步驟
外源性基因的獲取
將外源基因連接到對應(yīng)載體,并轉(zhuǎn)化入相應(yīng)宿主菌
篩選出含有重組子的菌落,提取質(zhì)粒,測序,確認無誤
表達小試,利用SDS-PAGE檢測
放大表達及純化鑒定
原核蛋白表達的優(yōu)劣勢
優(yōu)勢
大腸桿菌表達系統(tǒng)優(yōu)勢在于其背景和基因表達調(diào)控機制已經(jīng)有了很多深入的研究,商業(yè)化的配套試劑等完全成熟,而且大腸桿菌易于培養(yǎng),成本低,工藝放大容易實現(xiàn)。
劣勢
表達的蛋白轉(zhuǎn)錄和翻譯后的修飾
表達的蛋白容易形成包涵體
原核蛋白表達收費標準
索萊寶的原核蛋白表達服務(wù)依托于先進的研發(fā)平臺,專業(yè)的服務(wù)開發(fā)團隊和國際知名品牌的儀器設(shè)備,為優(yōu)質(zhì)的檢測服務(wù)提供了保障。同時,索萊寶還可提供其他的服務(wù)項目,如多肽合成、抗體制備、免疫學檢測和分子生物學檢測等。
蛋白表達研發(fā)平臺