我們?cè)谶M(jìn)行色譜檢測(cè)的方法開發(fā)時(shí)，可能會(huì)遇到這樣的難題：更換了各種型號(hào)的色譜柱，嘗試了酸性、中性、堿性的流動(dòng)相，但是目標(biāo)化合物仍然無(wú)法保留在色譜柱中。這些化合物通常極性較大，很容易電離。比如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿化合物或某些有機(jī)鹽等，普通的流動(dòng)相和色譜柱體系對(duì)這類化合物都沒(méi)有很好的保留效果，這時(shí)我們需要祭出一尊大神，有請(qǐng)色譜檢測(cè)的好幫手——離子對(duì)試劑的幫忙了。
什么是離子對(duì)試劑？
離子對(duì)試劑是由強(qiáng)親水離子形成，反作用于樣品分子的中性離子對(duì)。當(dāng)添加在流動(dòng)相中的離子對(duì)試劑進(jìn)入色譜柱后，一側(cè)的烷基鏈吸附在固定相上，另一側(cè)的可離子化終端吸附帶電荷的目標(biāo)化合物，從而提高色譜柱對(duì)樣品的保留能力。
為什么要使用離子對(duì)試劑？
盡管可能會(huì)對(duì)色譜柱造成傷害，但是離子對(duì)試劑也有著顯而易見的優(yōu)勢(shì)：
◆ 可以顯著縮短分離時(shí)間，獲得更好的分離效果；
◆ 緩沖液制備簡(jiǎn)單；
◆ 碳鏈長(zhǎng)度選擇眾多，可達(dá)到增加保留時(shí)間、改善分離性質(zhì)的效果；
◆ 可有效改善峰型。
如何選擇合適的離子對(duì)試劑？
離子對(duì)試劑的種類和濃度的選擇依賴于所需樣品的理化性質(zhì)。若樣品是酸性化合物，一般選用四丁基溴化銨（SIT3060）、十二烷基三甲基氯化銨（SID3010）等離子對(duì)試劑；若樣品是堿性化合物，可以選擇戊烷磺酸鈉（SIS1100）、己烷磺酸鈉（SIS1110）、庚烷磺酸鈉（SIS1060）等離子對(duì)試劑；對(duì)于溶質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)相差較大的混合樣品，離子對(duì)試劑種類的選擇則沒(méi)有特殊要求。同時(shí)，在選用離子對(duì)試劑時(shí)，一般盡可能優(yōu)先選用碳鏈短的離子對(duì)試劑，濃度盡量的低，這樣可以有效避免離子對(duì)試劑強(qiáng)保留對(duì)色譜柱產(chǎn)生的不可逆影響。
使用離子對(duì)試劑的時(shí)候還需注意什么？
選用離子對(duì)色譜分析法固然好處多多，但它的門檻也不低，一些重要的因素需要格外重視，否則將會(huì)影響檢測(cè)的峰型結(jié)果乃至儀器、色譜柱的長(zhǎng)期使用。
◆盡量專柱專用。大半部分離子對(duì)試劑以鹽為主，進(jìn)入色譜柱的離子對(duì)試劑很難清洗干凈。使用過(guò)離子對(duì)試劑的色譜柱換到其他流動(dòng)相使用后重現(xiàn)型較差。一般用過(guò)使用離子對(duì)試劑的色譜柱都是專用，不建議和其他流動(dòng)相混用；
◆注意體系重現(xiàn)性。離子對(duì)試劑本身沒(méi)有緩沖能力，對(duì)pH敏感，系統(tǒng)中殘留的酸和堿都會(huì)對(duì)體系造成影響；
◆需要長(zhǎng)時(shí)間平衡。離子對(duì)試劑在流動(dòng)相和色譜柱之間的平衡時(shí)間較長(zhǎng)，使用之前需要對(duì)色譜柱長(zhǎng)時(shí)間平衡，梯度方法的平衡要求比較高；
◆精準(zhǔn)控制用量。在加入離子對(duì)試劑時(shí)，在保證效果的同時(shí)加入量要盡量的少。這是因?yàn)樵谝欢ǚ秶鷥?nèi)，離子對(duì)試劑的加入量跟目標(biāo)樣品的保留正相關(guān)，由于跟固定相存在作用，所以一旦超過(guò)濃度，不僅不會(huì)增加目標(biāo)物的保留，反而會(huì)減少。一般長(zhǎng)鏈離子對(duì)試劑加入濃度在0.5mmol/L左右，短鏈離子對(duì)試劑加入濃度在5mmol/L左右，可以根據(jù)情況適當(dāng)增加。
Solarbio的離子對(duì)試劑
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Solarbio離子對(duì)試劑的優(yōu)勢(shì)：◆ 純度高：所有產(chǎn)品均具有較高純度；
◆ 適用范圍廣：針對(duì)HPLC、LC/MS，均能提供對(duì)應(yīng)的用于酸性樣品和堿性樣品分析的產(chǎn)品；
◆ 產(chǎn)品種類豐富：滿足色譜分析中絕大多數(shù)需要離子對(duì)試劑情況的需求。
