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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | 索萊寶 |
貨號(hào) | BC1960 |
英文名稱 | Soil Laccase |
包裝規(guī)格 | 50 管/48 樣 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
別名 | 土壤漆酶(Soil Laccase,SL)試劑盒 |
分子式 |
開(kāi)通黃鉆 BC1960 土壤漆酶(Soil Laccase,SL)試劑盒 土壤漆酶(Soil Laccase,SL)試劑盒 注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。 分光光度法 貨號(hào): BC1960 規(guī)格:50 管/48 樣 產(chǎn)品內(nèi)容: 提取液:甲苯50mL×1 瓶,4℃保存。自備。 試劑一:液體30mL×1 瓶,4℃保存。 工作液:粉劑×2 瓶,4℃避光保存,臨用前每瓶加15mL 試劑一溶解。 產(chǎn)品說(shuō)明: 漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍(lán)氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強(qiáng)的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。 漆酶分解底物ABTS 產(chǎn)生ABTS 自由基,在420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS,測(cè)定ABTS自由基的增加速率,可計(jì)算得漆酶活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、震蕩儀,甲苯。 測(cè)定操作 一、樣本處理 將新鮮土樣過(guò)40 目篩,按照土樣質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取 0.1g 土樣,加入1mL 提取液)加入提取液,30℃震蕩提取30min,于4℃,10000g,離心10min,取 上清置于冰上待測(cè)。 二、測(cè)定操作 1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到420nm,蒸餾水調(diào)零。 2. 取1mL 玻璃比色皿,加入100μ L 上清液,再加入600μ L 工作液,立即于420nm 處測(cè)定吸光值, 記為A1。 3. 記錄完數(shù)據(jù)立即將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至1.5mL 棕色Ep 管,置于震蕩儀上,30℃震蕩反應(yīng)5min, 取出 反應(yīng)液立即于420nm 處測(cè)定吸光值,記為A2?!?A=A2-A1 三、酶活性計(jì)算公式 酶活性定義:每克土壤每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。 SL 活性(nmol/min/g)= △ A/(ε×d)×V 反總÷(V 樣×W÷V 樣總)÷T= 38.9×△ A÷W ? ? ? ε:ABTS 毫摩爾消光系數(shù):36L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應(yīng)總體積, 0.7mL; V 樣:反應(yīng)中樣本體積,0.1mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL; W,樣本質(zhì)量, g;T:反應(yīng)時(shí)間,5min。 |