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產(chǎn)地 | 中國(guó) |
品牌 | solarbio |
貨號(hào) | G7210 |
用途 | 蛋白質(zhì)條帶的銀染是基于蛋白質(zhì)中各種基團(tuán)(如琉基、碳基等)與銀的結(jié)合,然后用還原劑如甲醛在堿性環(huán)境下使Ag+還原成銀顆粒,可把蛋白電泳帶染成黑褐色 |
英文名稱(chēng) | Silver Stain for Nucleic |
包裝規(guī)格 | 1L |
純度 | 現(xiàn)詢客服% |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進(jìn)口 | 否 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
1.中文名:PAGE凝膠銀染試劑盒
2.英文名:Silver Stain for Nucleic
3.分 類(lèi):生化試劑
4.保存條件:RT
5.品 牌:solarbio
PAGE凝膠銀染試劑盒
別名 : 蛋白快速銀染試劑盒 蛋白銀染
注:1L規(guī)格指可配制的硝酸銀染色液的體積,實(shí)際使用次數(shù)根據(jù)PAGE膠大小不同而不同。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
蛋白質(zhì)條帶的銀染是基于蛋白質(zhì)中各種基團(tuán)(如琉基、碳基等)與銀的結(jié)合,然后用還原劑如甲醛在堿性環(huán)境下使Ag+還原成銀顆粒,可把蛋白電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色。其靈敏度比考馬斯亮藍(lán)高,該產(chǎn)品整個(gè)過(guò)程操作簡(jiǎn)單,靈敏度高,能檢測(cè)到10ng以下的蛋白條帶。
操作步驟:
一、染色液配制
需要配制的染色液體積根據(jù)PAGE膠的大小而定,一般的mini-PAGE膠需要20-30mL。配制用的器皿清洗干凈后用去離子水涮洗,染色液須用去離子水配制,現(xiàn)用現(xiàn)配。如果配制的溶液體積不是100mL,可以按比例改變各成分用量。
1,固定液:取40ml染色液A,10ml染色液B加去離子水至100ml,混勻;
2,敏化液: 取30ml染色液A,10ml染色液D加去離子水至100ml,混勻;
3,硝酸銀染液:稱(chēng)取0.12g硝酸銀,用50ml去離子水溶解,加入20ul溶液C混勻,加去離子至100ml現(xiàn)用 現(xiàn)配。
4,顯色液: 10ml溶液E和30ul溶液C加入去離子水至100ml,混勻,現(xiàn)用現(xiàn)配。
5,終止液:取5ml染色液B加去離子水稀釋至100ml,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二、染色:
1,PAGE電泳結(jié)束后,將PAGE蛋白膠轉(zhuǎn)移至玻璃平皿或搪瓷盤(pán)中,用固定液固定30min。
2,將PAGE膠轉(zhuǎn)移至敏化液中,使染液沒(méi)過(guò)PAGE膠,室溫作用30min??芍糜趽u床上緩慢搖晃
3,棄去敏化液,用去離子水漂洗三次,每次10min。
4,將PAGE膠轉(zhuǎn)移至硝酸銀染液中,使染液沒(méi)過(guò)PAGE膠,室溫?fù)u晃40min。
5,將PAGE膠轉(zhuǎn)移至顯色液中,使顯色液沒(méi)過(guò)PAGE膠,室溫?fù)u晃,該顯色一般在10min左右,。
6,在選擇合適的時(shí)間進(jìn)行終止,棄去顯色液,加入終止液即可。*可進(jìn)行信號(hào)收集保存。
注意事項(xiàng):
1. 銀染主要出現(xiàn)在PAGE膠的表面,使用薄膠(0.5-0.75mm)可以提高靈敏度。
2. 對(duì)于考馬斯亮藍(lán)染色的SDS-PAGE膠,可用甲醇將膠漂洗后,繼續(xù)進(jìn)行銀染??既具^(guò)程中的乙酸會(huì)干擾銀染,因此要確保將PAGE凝膠中殘留的乙酸徹底洗凈。
3. 不同蛋白質(zhì)對(duì)銀染的反應(yīng)是不一樣的,尤其是堿性蛋白染色效果差。因此,不宜用銀染測(cè)定不同蛋白的比例。
4. 染色過(guò)程中,緩慢的振蕩是必要的,一般選擇40-60 rpm.
5. 凝膠表面的裂紋多是由于壓力、手印及表面干燥所致,所以全程中都應(yīng)帶手套操作。
6. PAGE凝膠背景呈均一的黑色多是水中的雜質(zhì)引起的,所以溶液的配制應(yīng)使用電導(dǎo)率小于1 μS的去離子水。
7. 如果染色后有呈灰塵或煙霧狀灰色或棕色的沉淀出現(xiàn)在凝膠表面,可能是在幾步漂洗過(guò)程中洗得不夠徹底,或是染色過(guò)程時(shí)溫度太低。
8. 較深的銀染背景多是丙烯酰胺中的雜質(zhì)所致。
9. PAGE膠中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100和兩性電解質(zhì)這些物質(zhì)會(huì)干擾銀染。
10. 室溫操作時(shí),溫度的波動(dòng)往往會(huì)干擾銀染的效果,恒溫水浴可以解決這個(gè)問(wèn)題。
11. 憑借戊二醛預(yù)處理可以使各種蛋白質(zhì)的染色提高40倍。
12. 染色使用的玻璃器皿必須非常干凈,用酸浸泡可以滿足要求。
13. 銀染應(yīng)盡快照相,隨著時(shí)間延長(zhǎng),蛋白條帶會(huì)變淺,而背景會(huì)加深。
14. 銀染容器最理想的是玻璃平皿,其次是搪瓷盤(pán)和密胺塑料盤(pán)等。
PAGE凝膠銀染試劑盒的詳細(xì)描述
PAGE凝膠銀染試劑盒的原理是銀離子可與核酸形成穩(wěn)定的復(fù)合物,然后用還原劑如甲醛在堿性環(huán)境下使Ag+還原成銀顆粒,可把核酸電泳帶染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝膠電泳染色。其靈敏度比EB高200倍,該產(chǎn)品整個(gè)過(guò)程只需要20分鐘,操作簡(jiǎn)單,靈敏度高,能檢測(cè)到10ng以下的DNA條帶.僅用于科研試驗(yàn)。
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公司簡(jiǎn)介
北京索萊寶科技有限公司 始創(chuàng)于 2000年, 是一家集 產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售、服務(wù)于一體的大型高科技生物企業(yè)。公司總部位于北京,擁有1200平米研發(fā)生產(chǎn)中心,公司提供的產(chǎn)品近萬(wàn)種,超過(guò)5000種常備現(xiàn)貨,涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域,并不斷推陳出新擴(kuò)充種類(lèi),為用戶提供優(yōu)秀,專(zhuān)業(yè)的產(chǎn)品。立足北京,輻射全國(guó),隨著產(chǎn)品營(yíng)銷(xiāo)戰(zhàn)略的不斷延伸,我們將逐步發(fā)展成為專(zhuān)業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,利用各自的資源優(yōu)勢(shì)和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神,為中國(guó)生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展,現(xiàn)公司正在誠(chéng)招各地代理商,歡迎垂詢并期待您的加入!