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產(chǎn)地 | 中國 |
品牌 | solarbio |
貨號 | BC2660 |
用途 | 多聚半乳糖醛酸酶(PG)檢測 |
英文名稱 | 多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒 |
包裝規(guī)格 | 50管/24樣 |
純度 | 現(xiàn)詢客服% |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 6個月 |
是否進口 | 否 |
多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒
多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒的測定意義:
多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一種細(xì)胞壁結(jié)合蛋白,可以催化果膠分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,參與果膠的降解,使細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)解體,導(dǎo)致果實軟化,與果實成熟、葉和花的脫落、病原物防御,細(xì)胞伸展發(fā)育以及木質(zhì)化有關(guān),在植物抗病性和食品貯藏保鮮領(lǐng)域具有較高的研究價值。
多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒的測定原理:
多聚半乳糖醛酸酶水解果膠酸生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與DNS試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,測定540nm處吸光值變化可計算得多聚半乳糖醛酸酶活性。
多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意:正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號: BC2660
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品簡介:
多聚半乳糖醛酸酶(Ploygalacturonase, PG)屬果膠酶的一種,廣泛存在于植物、細(xì)菌及真菌中。其催化多聚半乳糖醛酸分解,在果實軟化、花粉授粉、種子發(fā)育成熟及器官脫落等方面具有重要作用,并且病原菌在侵染宿主植物時,可分泌多聚半乳糖醛酸酶來降解宿主細(xì)胞壁,進而導(dǎo)致病程發(fā)展。
PG 水解多聚半乳糖醛酸生成半乳糖醛酸,半乳糖醛酸與 DNS 試劑反應(yīng)生成在 540 nm 有特征吸收峰的棕紅色物質(zhì),測定 540 nm 處吸光值變化可計算得果膠酶活性。
試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計、低溫臺式離心機、水浴鍋、1 mL 玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體 30 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 8 mL×1 瓶,4℃保存。若溶液中有晶體析出,37℃水浴溶解。
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加入 8 mL 蒸餾水,60℃水浴助溶。
試劑三:液體 20 mL×1 瓶,4℃避光保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,10 mg 半乳糖醛酸,4℃保存。臨用前加入 0.943 mL 蒸餾水,配成 50 μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。
操作步驟:
一、粗酶液提取:
組織:按照質(zhì)量(g): 蒸餾水體積(mL)為 1 : 5~10 的比例(建議稱取約 0.1 g,加入 1 mL 提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于 4℃,16000 g,離心 10 min,取上清置于冰上待測。
細(xì)菌:先收集細(xì)菌到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為 500~1000︰1 的比例(建議 500 萬個細(xì)菌加入 1 mL 提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)菌(功率 20%或 200 W,超聲 3 s,間隔 7 s,總時間 5 min);然后 4℃,16000 g,離心 10 min 取上清置于冰上待測。
液體:直接檢測或用提取液稀釋后檢測。
二、測定步驟:
1、 分光光度計預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長至 540 nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將 50 μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋為 10、6、4、3、2、1.5、1.2 μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
3、 操作表:(在 1.5mL 離心管中)
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