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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | solarbio |
| 貨號 | D8020 |
| 用途 | 小牛胸腺DNA(CT-DNA)是一種天然的DNA廣泛用于研究DNA綁定抗癌劑和DNA綁定代理,調(diào)節(jié)DNA結(jié)構(gòu)和功能。 |
| 包裝規(guī)格 | 50mg |
| 純度 | 98% |
| CAS編號 | 73049-39-5 |
| 是否進口 | 否 |
產(chǎn)品簡介：
1. 中文名： 小牛胸腺 DNA
2. 英文名： Calf Thymus DNA
3. CAS＃： 73049-39-5
4. 別 名：DNA sodium salt from calf thymus Thymonucleic acid sodium salt
5. 外 觀：白色纖維狀
6. 特 性：型號：Type I
7. 溶解性：溶于水，參考濃度1mg/ml，4℃條件下輕輕搖晃過夜為佳方法，但不可劇烈 震蕩。
8. S：22-24/25
9. 儲存條件：2-8℃
10. 產(chǎn) 地：
11. 說 明：用于DNA相關(guān)研究。
制備方法：
1. 取新鮮（或冰凍）的小牛胸腺，除去血水和結(jié)締組織，在冰浴上切成小塊，稱取 20g，加入2倍體積的0.1mol/L氯化鈉-0.05mol /L，pH=7.0檸檬酸鈉緩沖溶液，于組織搗碎機上高速勻漿5分鐘。
2. 組織糜用轉(zhuǎn)速為 3000r/min的 離心機 離心15分鐘，將沉淀用50 mL上述緩沖溶液洗滌2次，洗滌時用勻漿器研磨洗滌，每次如前離心。向后得到的細胞核沉淀中加入6倍體積的10%氯化鈉溶液，充分攪勻置冰箱中過夜，以充分提取DNP，溶液為粘稠狀。將所得的半透明粘稠狀液體，用滴管慢慢注入冷 蒸餾 水中，邊加邊輕輕攪動（NaCl的終濃度為0.14mol/L），這時有白色絲狀物——核蛋白析出，在冰箱中靜置數(shù)小時，收集沉淀。將沉淀物再溶于4倍體積的10%氯化鈉溶液中，迅速攪拌以加速溶解。加入1/2體積的氯仿- 異戊醇混合液，劇烈振蕩5分鐘左右，用轉(zhuǎn)速為3000r/min的離心機離心15分鐘，得三層：上層為含有DNA和DNA核蛋白的水層，下層為氯仿-異戊醇的有機溶劑層，變性蛋白質(zhì)介于兩層之間。
6. 吸出上面的水層，再用氯仿 -異戊醇如前進行脫蛋白，直至界面處不再出現(xiàn)變性蛋白質(zhì)為止。
7. 后吸出上清液并將其注入兩倍體積的 95%乙醇中，用玻璃棒攪起白色纖維狀DNA沉淀，瀝干，用80%乙醇洗滌，后用少量無水乙醇洗滌。盡量瀝干乙醇后，鋪開在表面皿上。置于真空干燥器內(nèi)干燥，即得白色纖維DNA鈉鹽。
注意事項 ：
（ 1）由于DNA主要存在于細胞核中，為了便于提取DNA，應嚴格控制胸腺破碎的條件，既要將細胞膜破碎，又要盡可能避免細胞核被破壞，導致DNA釋放而被斷裂，。
（ 2）在用氯仿-異戊醇除去組織蛋白時，要劇烈振蕩使蛋白變性。若振蕩不夠，蛋白質(zhì)不能很好除去，則影響DNA制品的質(zhì)量。
