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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | BC2335 |
| 保存條件 | 2-8℃保存 |
| 英文名稱 | Chymotrypsin activity assay kit |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣 產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價(jià)格：1200
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵字:： 糜蛋白酶檢測(cè)試劑盒|糜蛋白酶檢測(cè)|糜蛋白酶|試劑盒
簡(jiǎn)要介紹：
糜蛋白酶，又稱胰凝乳蛋白酶，是*分泌的一種蛋白水解酶，能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似，但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化，對(duì)膿性和非膿性痰液均有效；也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合，如白內(nèi)障摘除。
糜蛋白酶催化ATEE水解，產(chǎn)物在237nm有特征光吸收；通過測(cè)定237nm光吸收增加速率，來計(jì)算糜蛋白酶活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加入20mL蒸餾水充分溶解。
產(chǎn)品說明：
糜蛋白酶，又稱胰凝乳蛋白酶，是*分泌的一種蛋白水解酶，能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似，但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化，對(duì)膿性和非膿性痰液均有效；也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合，如白內(nèi)障摘除。
糜蛋白酶催化ATEE水解，產(chǎn)物在237nm有特征光吸收；通過測(cè)定237nm光吸收增加速率，來計(jì)算糜蛋白酶活性。
試驗(yàn)所需自備儀器和樣品：
臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV 板)、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提取：
組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積（ml）1：5-10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml試劑一進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清即粗酶液。
測(cè)定：
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到237nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二置于37℃水浴中保溫30min。
3. 空白管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20μL試劑一，200μL試劑二，混勻于237nm測(cè)定4min內(nèi)吸光值變化，記為△A 空白管。（從吸光值穩(wěn)定增加開始計(jì)時(shí)）
4. 測(cè)定管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20μL 粗酶液，200μL試劑二，混勻于237nm測(cè)定4min內(nèi)吸光值變化，記為△A測(cè)定管。（從吸光值穩(wěn)定增加開始計(jì)時(shí)）
注意：空白管只需要測(cè)定一次。
三、糜蛋白酶活性計(jì)算：
a.使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1）按蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義：25℃每毫克蛋白每分鐘催化吸光值增加1為一個(gè)酶活單位。
糜蛋白酶（U/mg prot）= (△A 測(cè)定管－△A 空白管) ×V 反總÷(Cpr×V1)÷T
=2.75×(△A 測(cè)定管－△A 空白管)÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算
活性單位定義：25℃每克樣品每分鐘催化吸光值增加1為一個(gè)酶活單位。
糜蛋白酶（U/g）=(△A 測(cè)定管－△A 空白管) ×V 反總÷(W×V1÷V2)÷T
=2.75×(△A 測(cè)定管－△A 空白管)÷W
W：樣品質(zhì)量（g）；Cpr：粗酶液蛋白質(zhì)濃度（mg/mL），需要另外測(cè)定；V1：加入反應(yīng)體系中粗酶液體積（mL），20μL=2×10-2 mL；V2：粗酶液總體積（mL），1 mL；V 反總：反應(yīng)總體積，220μL=0.22mL； T：反應(yīng)時(shí)間（min），4min。
b.使用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1）按蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義：25℃每毫克蛋白每分鐘催化吸光值增加1為一個(gè)酶活單位。
糜蛋白酶（U/mg prot）= (△A 測(cè)定管－△A 空白管) ×V 反總÷(Cpr×V1)÷T
=2.75×(△A 測(cè)定管－△A 空白管)÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算
活性單位定義：25℃每克樣品每分鐘催化吸光值增加1為一個(gè)酶活單位。
糜蛋白酶（U/g）=(△A 測(cè)定管－△A 空白管) ×V 反總÷(W×V1÷V2)÷T
=2.75×(△A 測(cè)定管－△A 空白管)÷W
W：樣品質(zhì)量（g）；Cpr：粗酶液蛋白質(zhì)濃度（mg/mL），需要另外測(cè)定；V1：加入反應(yīng)體系中粗酶液體積（mL），20μL=2×10-2 mL；V2：粗酶液總體積（mL），1 mL；V 反總：反應(yīng)總體積，220μL=0.22mL； T：反應(yīng)時(shí)間（min），4min。
注意事項(xiàng)：
臨用前配置的試劑配置好后3天內(nèi)使用完畢。
