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| 產地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC2340 |
| 用途 | |
| 英文名稱 | Lipase (LPS) activity detection kit |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 保質期 | 1年 |
| 是否進口 |
產品規(guī)格：50管/48樣 產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價格：420
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關鍵字: 脂肪酶檢測試劑盒|LPS檢測試劑盒|脂肪酶|試劑盒
簡要介紹：
LPS 又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中 LPS 的異常增高常見于*炎和*癌。
LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測定脂肪酸生成速率，即可計算 LPS 活性。
產品詳細描述
產品內容：
試劑一：液體80mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體10mL×1瓶，室溫保存。
試劑三：液體20mL×1瓶，4℃保存。
標準品：0.06mL×1支。臨用前加入1.5 mL無水乙醇，充分溶解配制成125 μmol/mL的油酸標準溶液，4℃保存。用前注意解凍溶解。
產品說明：
LPS又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見于*炎和*癌。
LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測定脂肪酸生成速率，即可計算LPS活性。
自備儀器和用品：
研缽、臺式離心機、震蕩混勻器、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、甲苯、無水乙醇、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
組織樣品：稱取約0.1g樣品，加試劑一1.0 mL充分研磨，于4℃，15000rpm離心30min，取上清液待測。
血清樣品：直接檢測。
二、測定步驟：
分光光度計預熱30min以上，調節(jié)波長至710nm，甲苯調零。
試劑一和試劑二置于37℃水浴預熱30min以上。
標準溶液的稀釋：將125 μmol/mL的油酸標準溶液稀釋為125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.9 μmol/mL的標準溶液待測。
操作表：
| 加入試劑（mL） | 空白管 | 測定管 | 標準管 | |||||
| 試劑一 | 0.375 | 0.375 | 0.375 | |||||
| 試劑二 | 0.125 | 0.125 | 0.125 | |||||
| 反復震蕩混勻 | ||||||||
| 蒸餾水 | 0.2 | |||||||
| 上清液/血清 | 0.2 | |||||||
| 標準溶液 | 0.2 | |||||||
| 迅速震蕩混勻后置于37℃水浴準確反應10 min | ||||||||
| 甲苯 | 1 | 1 | 1 | |||||
| 反復震蕩混勻后，室溫4000rpm離心10 min | ||||||||
| 取出離心管，小心吸取上層溶液0.9 mL，加入另一2 mL塑料離心管中，按下表操作： | ||||||||
| 加入試劑（mL） | 空白管 | 測定管 | 標準管 | |||||
| 試劑三 | 0.225 | 0.225 | 0.225 | |||||
反復震蕩混勻；室溫4000rpm離心10 min，小心吸取上層溶液800 μL，加入1mL玻璃比色皿，于710nm處測定吸光值。記為A空白管，A測定管，A標準管，計算ΔA測定= A測定管-A空白管，ΔA標準= A標準管-A空白管。
三、LPS活性計算：
標準曲線的繪制：以油酸標準溶液濃度為橫坐標，ΔA標準為縱坐標，繪制標準曲線，得到標準方程y=kx+b。將ΔA測定帶入方程，得到x（μmol/mL）
酶活計算：
（1）按蛋白濃度計算：
活性單位定義：37℃中每毫克蛋白每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
LPS (U/mg prot) =x×V樣÷（Cpr×V樣) ÷T= 0.1×x÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
活性單位定義：37℃中每克組織每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
LPS (U/g 鮮重) =x×V樣÷（W×V樣÷V提) ÷T= 0.1×x÷W
（3）按血清計算：
活性單位定義：37℃中每毫升血清每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
LPS (U/mL 血清) =x÷T= 0.1×x。
V樣：加入反應體系中上清液體積，0.2 mL；Cpr：上清液蛋白質濃度，mg/mL，需要另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質含量測定試劑盒；T：催化反應時間，10 min。W：樣本鮮重，g；V提：提取液體積，1mL。
注意事項：
1、甲苯有毒，實驗過程中需佩戴手套和口罩。
2、實驗過程中須遠離火源。
3、當吸光度大于1時，建議將樣本稀釋后測量。
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