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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | BC0955 |
| 用途 | |
| 英文名稱 | Succinate dehydrogenase (SDH) detection kit |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
| 是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體60mL×1瓶，-20℃保存；
試劑二：液體0.6mL×1瓶，-20℃保存；
試劑三：液體5mL×1瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入到試劑三中溶解待用；
試劑五：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入4mL雙蒸水，用不完的試劑仍4℃保存；
試劑六：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入3.333mL雙蒸水，用不完的試劑4℃保存。
產(chǎn)品說明：
SDH（EC 1.3.5.1）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。SDH是線粒體的一種標(biāo)志酶 ，位于線粒體內(nèi)膜 上的一種膜結(jié)合酶，是連接呼吸電子傳遞和氧化磷酸化的樞紐之一。此外，為多種原核細(xì)胞產(chǎn)能的呼吸鏈 提供電子。
SDH催化琥珀酸脫氫生成延胡索酸，脫下的氫通過吩嗪二甲酯硫酸（PMS）傳遞還原2,6-二氯f(wàn)en靛酚（DCPIP），并且在600nm處具有特征吸收峰，通過600nm吸光度的變化，測(cè)定2．6-DPIP的還原速度，代表SDH酶活性。
試驗(yàn)所需自備儀器和樣品：
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、SDH的提取
準(zhǔn)確稱取0.1g組織或收集500萬(wàn)細(xì)胞，加入1mL試劑一和10uL 試劑二，用冰浴勻漿器或研缽勻漿充分研磨，4 ℃ 11000 g離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟和加樣表
分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至600nm，蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測(cè)定
| 試劑名稱（μL） | 測(cè)定管 | 空白管 |
| 試劑三 | 60 | 60 |
| 試劑五 | 60 | 60 |
| 蒸餾水 | 800 | 800 |
| 37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃（其它物種）保溫10min左右 | ||
| 樣本 | 30 | |
| 蒸餾水 | 30 | |
| 試劑六 | 30 | 30 |
依次加各試劑到1 mL比色皿中，在加入試劑六的同時(shí)開始計(jì)時(shí)；在600 nm波長(zhǎng)下記錄20秒時(shí)的初始吸光度A1，比色后迅速將比色皿連同反應(yīng)液一起放入37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴中，準(zhǔn)確反應(yīng)1分鐘；迅速取出比色皿并擦干，600 nm下比色，記錄1分20秒時(shí)的吸光度A2，計(jì)算ΔA=A1-A2，得到ΔA測(cè)定，ΔA空白。
相關(guān)文獻(xiàn)：
《Cell death induced by α-terthienyl via reactive oxygen species-mediated mitochondrial dysfunction and oxidative stress in the midgut of Aedes aegypti larvae》 作者:JieZhangaShakilAhmadaLan-YingWangaQianHanbJian-ChunZhangaYan-PingLuo 期刊:Free Radical Biology and Medicine 影響因子:5.657 PMID:31022448
