|
| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | BC1635 |
| 保存條件 | 2-8℃保存 |
| 英文名稱(chēng) | Micro?Laccase Assay Kit |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價(jià)格：1620
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 漆酶檢測(cè)試劑盒|漆酶活性檢測(cè)試劑盒|漆酶|試劑盒
簡(jiǎn)要介紹：
漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強(qiáng)的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。
漆酶分解產(chǎn)物ABTS 產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS，測(cè)定ABTS 自由基的增長(zhǎng)速率，可計(jì)算得漆酶的活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體30mL×1 瓶，4℃保存。
工作液：粉劑×2 瓶，4℃避光保存，臨用前加15mL 試劑一溶解。
產(chǎn)品說(shuō)明：
漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高
等植物中，具有較強(qiáng)的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解
以及生物檢測(cè)方面有非常廣泛的應(yīng)用。
漆酶分解產(chǎn)物ABTS 產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS，測(cè)定
ABTS 自由基的增長(zhǎng)速率，可計(jì)算得漆酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
操作步驟：
酶液提取
細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500-1000:1 的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率30％或300W，超聲3s，間隔7s，總時(shí)間3min），12000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（ml）為1:5-10 的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿；10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
培養(yǎng)液：直接待檢。
測(cè)定操作表
酶活性計(jì)算公式：
| 對(duì)照管 | 測(cè)定管 | |
| 樣本（mL） | 0.1 | |
| 煮沸樣本（mL） | 0.1 | |
| 工作液（mL） | 0.6 | 0.6 |
| 60℃，3min，測(cè)定420nm 處吸光值A，△A=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管 | ||
按照蛋白濃度計(jì)算
酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）
漆酶活性（U/mg prot）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷(V 樣×Cpr)÷T= 65×△A÷Cpr
按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活性定義：每克樣品每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）
漆酶活性（U/g）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷(V 樣×W)÷T= 65×△A÷W
按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活性定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）
漆酶活性（U/104 cell）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷(V 樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總)÷T= 65×△A÷細(xì)胞數(shù)量
按照液體體積計(jì)算
酶活性定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）
漆酶活性（U/L）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷V 樣÷T= 65000×△A
ε：ABTS 毫摩爾消光系數(shù)；36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.7mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.1mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T:反應(yīng)時(shí)間，3min
注意事項(xiàng)：
工作液需臨用前配制，并且盡快使用，4℃保存一周，若變色則不能使用。
測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，若吸光值較高，請(qǐng)將樣品用提取液?行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定，并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
