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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC3135 |
用途 | |
英文名稱 | Betaine content test kit |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液(自備):80%甲醇。取80mL甲醇,加20mL蒸餾水。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑 1mg×2 支,4℃保存,臨用前加1mL蒸餾水充分溶解。
試劑一:粉劑 0.12g×2 瓶,4℃保存,臨用前根據(jù)用量配制,每瓶加4mL蒸餾水溶解,加78μL濃鹽酸調(diào) pH為1。
試劑二:99%乙mi,自備。取無水乙mi5.94mL ,加入蒸餾水0.06mL ,混勻。
試劑三:70%丙tong,( 易揮發(fā),根據(jù)用量自備,丙tong:蒸餾水=7:3)。
產(chǎn)品說明:
甜菜堿是一種廣泛分布于動植物及微生物體內(nèi)的季銨型水溶性生物堿,是生物體內(nèi)膽堿的氧化產(chǎn)物,可以增強免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤,并可作為甲基供體,參與促進(jìn)動物蛋
白質(zhì)和脂肪代謝、增進(jìn)食欲、緩和應(yīng)激、調(diào)節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用,在化工、
醫(yī)藥、食品添加劑等領(lǐng)域有較廣泛的應(yīng)用。
甜菜堿在強酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生沉淀,沉淀用丙tong溶解形成紅色溶液,在 525nm處有特征吸收峰,測定 525nm 處的吸光值,可計算得樣品的甜菜堿含量。
自備實驗用品及儀器
天平、離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、甲醇、乙mi、鹽酸和蒸餾水。
操作步驟:
一、甜菜堿提取
取烘干后過40目篩的樣品約0.2g,加1mL提取液,置于60℃提取30min,期間不斷震蕩。10000g,25℃,離心 15min,取上清液。
測定操作表
1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至525nm。
2、操作表
標(biāo)準(zhǔn)管 | 測定管 | |
上清液(μL) | 50 | |
標(biāo)準(zhǔn)品(μL) | 50 | |
試劑一(μL) | 70 | 70 |
充分混勻,4℃中反應(yīng) 2h,8000rpm,25℃,離心 15min,棄上清 | ||
試劑二(μL) | 60 | 60 |
8000rpm,25℃,離心 10min,置于通風(fēng)櫥使試劑二自然揮發(fā)干凈 | ||
試劑三(μL) | 200 | 200 |
震蕩使沉淀充分溶解,取200μL于微量石英比色皿/96孔板,試劑三調(diào)零,記錄標(biāo)準(zhǔn)管和測定管525nm處吸光值A525。 |
注意:標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
三、甜菜堿含量計算公式
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
甜菜堿含量(mg/g)= A525測定管÷A525標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)品×V標(biāo)準(zhǔn)÷(V 樣÷V 樣總×W)
=A525測定管÷A525標(biāo)準(zhǔn)管÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度,1mg/mL;V 反總:標(biāo)準(zhǔn)品體積,0.05mL;V 樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣本質(zhì)量,g
b. 用96孔板測定的計算公式如下
甜菜堿含量(mg/g)= A525測定管÷A525標(biāo)準(zhǔn)管×C標(biāo)準(zhǔn)品×V標(biāo)準(zhǔn)÷(V樣÷V樣總×W)
=A525測定管÷A525標(biāo)準(zhǔn)管÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品濃度,1mg/mL;V 反總:標(biāo)準(zhǔn)品體積,0.05mL;V 樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣本質(zhì)量,g
注意事項
1、 試劑一配制時 pH 嚴(yán)格控制為 1,否則會導(dǎo)致反應(yīng)不完全,配制后 4℃只能穩(wěn)定幾個小時,
配制后盡快使用。
2、 試劑二與試劑三對呼吸道有一定的刺激,請做好防護(hù)工作。
3、 *檢出限為 1mg/g。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID: