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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | BC3680 |
| 保存條件 | 2-8℃保存 |
| 英文名稱 | Original pectin content test kit |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
原果膠含檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法
英文名稱：Original pectin content test kit
關(guān)鍵詞：原果膠|原果膠含量檢測(cè)|原果膠含量
注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
貨號(hào)：BC3680
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液一：液體 110mL×1 瓶，4℃保存。
提取液二：液體 70mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：濃硫酸 60mL，自備。
試劑二：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 5mL×1 瓶，4℃避光保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，10mg 半乳糖醛酸， 4℃保存。臨用前加入 0.943mL 提取液二，配成 50μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)液
產(chǎn)品說明：
果膠是植物細(xì)胞壁主要組成成分之一，分為水溶性果膠和不溶性果膠，不溶性果膠為原果膠。 原果膠是不溶于水的物質(zhì)，但可在酸、堿、鹽等化學(xué)試劑及酶的作用下，加水分解轉(zhuǎn)變成水溶性果 膠，在食品、紡織、印染、煙草、冶金等領(lǐng)域具有較廣泛的應(yīng)用。 原果膠在稀酸中水解為可溶性果膠，并進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為半乳糖醛酸，產(chǎn)物在強(qiáng)酸中與咔zuo縮合生 成紫紅色化合物，在 530 nm 處有特征吸收峰。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑： 可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、濃硫酸、1mL 玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿 器和蒸餾水。
操作步驟：
原果膠的提?。?/span> 將組織樣品搗碎，按照樣品質(zhì)(g)和提取液一體積(mL)為 1: 20 的比列（建議取約 0.05g 樣品， 加入 1mL 提取液一），置于 90℃恒溫水浴鍋中浸提 30min，取出冷卻后于 5000g、25℃離心 10min， 去掉上清，沉淀中再加入 1mL 提取液一重復(fù)操作一次，離心后去上清，沉淀中加入 1mL 提取液二， 置于 90℃恒溫水浴鍋中水解 1h，取出冷卻后于 8000g、25℃離心 15min，取上清液待測(cè)。
測(cè)定步驟：
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 530nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將 50μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液用提取液二稀釋為 1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125 μmol/mL 的標(biāo) 準(zhǔn)溶液備用。
3、 操作表：
試劑名稱 空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 對(duì)照管 測(cè)定管
樣本（μL） - - 100 100
標(biāo)準(zhǔn)品（μL） - 100 - -
蒸餾水（μL） 100 - - -
試劑一（μL） 800 800 800 800
混勻、90℃放置 10min，取出后冷卻
試劑二（μL） - - 100 -
試劑三（μL） 100 100 - 100
混勻，25℃靜置 30min 后測(cè)定 530nm 處吸光值，分別記為 A 空白管、A 標(biāo) 準(zhǔn)管、A 對(duì)照管和 A 測(cè)定管?！?/span>A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管，△A 測(cè)定=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。
原果膠含的計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制： 以各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為 x 軸，其對(duì)應(yīng)的△A 標(biāo)準(zhǔn)為 y 軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程 y=kx+b， 將△A 測(cè)定帶入方程得到 x（μmol/mL）
原果膠含的計(jì)算： 原果膠含(μmol /g 鮮重)= x×V 提取液二÷W =x÷W
V 提取液二：加入提取液二的體積，1mL；
W：樣本鮮重，g。
注意事項(xiàng)：
濃硫酸具有強(qiáng)腐蝕性，操作時(shí)需特別注意，90℃加熱、冷卻后再打開蓋子，以防液體飛濺燒傷。
2、 若吸光值超過 0.8，可將樣本提取液二進(jìn)行適當(dāng)稀釋再進(jìn)行測(cè)定，并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
