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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC2715 |
用途 | |
英文名稱 | Total sugar content test kit |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑三:液體 5mL×1 瓶,4℃避光保存;
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1 支,10mg 無水葡萄糖,4℃保存;臨用前加 1mL 蒸餾水溶解為 10mg/mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品備用。
試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品中總糖的提取:
組織:稱取約 0.1g 樣品,加入 1mL 試劑一,1.5mL 蒸餾水,勻漿,沸水浴 30min,加入 1mL
試劑二,混勻,用蒸餾水定容至 10mL,8000g 25℃離心 10min,取上清液待測。(注意稀釋,見注意事項)
血清(漿)、液體體積:取 0.1mL 血清(漿),加入 0.1mL 試劑一,0.15mL 蒸餾水,勻漿,沸水浴 30min,加入 0.1mL 試劑二,混勻,用蒸餾水定容至 1mL,8000g 25℃離心 10min,取上清液待測。(注意稀釋,見注意事項)
二、測定操作表:
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 540nm,蒸餾水調(diào)零。
2、標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:將標(biāo)準(zhǔn)品用蒸餾水稀釋至 1.5、1、0.8、0.6、0.5、0.4、0.2、0.1mg/mL。
3、加樣表:
試劑(μL) 空白管 測定管 標(biāo)準(zhǔn)管
蒸餾水 30
樣本 30
標(biāo)準(zhǔn)品 30
試劑三 30 30 30
混勻,沸水浴 10min(蓋緊,以防止水分散失),冷卻至室溫
蒸餾水 180 180 180
混勻,取出 200μL 在 540nm 下測定吸光值,并計算?A 測=A 測定管-A 空白管、?A 標(biāo)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。
三、總糖含量計算:
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:
以標(biāo)準(zhǔn)管的濃度為x軸,對應(yīng)的?A標(biāo)為y軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b,將?A測帶入方程中計算得x(mg/mL)。
2、按樣本鮮重計算:
總糖(mg/g 鮮重)=(x×V 樣總)÷W×稀釋倍數(shù)=10×x÷W×稀釋倍數(shù)
3、按血清(漿)、液體體積計算:
總糖(mg/mL)=(x×V 提)÷V 樣×稀釋倍數(shù)=10×x×稀釋倍數(shù)
V 樣總:組織樣本總體積,10mL;
W:樣本鮮重,g;
V 提:血清或液體樣本總體積,1mL;
V 樣:血清或液體體積,0.1mL。
注意事項:
1、空白管只需做一管。
2、如果?A 大于 1.2,需要將上清液用蒸餾水稀釋,計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
3、此試劑盒對于纖維素的分解程度無法達(dá)到 100%。
注意:*檢測限為 5mg/g 鮮重。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Tolerance of Ruppia sinensis Seeds to Desiccation, Low Temperature, and High Salinity With Special Reference to Long-Term Seed Storage》 作者:Ruiting Gu, Yi Zhou, Xiaoyue Song, Shaochun Xu, Xiaomei Zhang, Haiying Lin, Shuai Xu, Shidong Yue, and Shuyu Zhu 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:5.36 PMID:29628930