![]() |
產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號(hào) | BC0300 |
用途 | |
英文名稱 | ATP content detection kit |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:1400
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字:ATP含量檢測(cè)試劑盒|ATP檢測(cè)試劑盒|試劑盒|
簡(jiǎn)要介紹:
ATP 廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。
測(cè)定ATP 含量并且計(jì)算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。肌酸激酶催化肌酸和ATP 反應(yīng)生成磷酸肌酸,可在700nm 下用磷鉬酸比色法檢測(cè)磷酸肌酸含量,以此反應(yīng)ATP 含量。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
組分 | 規(guī)格 | 保存 | |
試劑一 | 底物液Ⅰ | 粉劑×1瓶 | 室溫保存 |
底物液Ⅰ配制:用時(shí)加10mL煮沸雙蒸水溶解,并沸水浴使溶解完全;臨用前觀察如有結(jié)晶,可沸水浴溶解后置于37℃保存待測(cè)。 | |||
試劑二 | 底物液Ⅱ | 20mL×1瓶 | 4℃保存 |
試劑三 | 促進(jìn)劑 | 粉劑×2 支 | -20℃保存 |
稀釋液760μL×2瓶 | 4℃保存 | ||
試劑三應(yīng)用液(促進(jìn)劑)配制:臨用前取1支試劑三稀釋液加入1支試劑三粉劑中,充分溶解備用。 | |||
試劑四 | 沉淀劑 | 液體5.5 mL×1瓶 | 4℃保存 |
試劑五 | 顯色劑 | 甲液7 mL×4瓶 | 4℃保存 |
乙液6mL×4瓶 | 4℃保存 | ||
顯色應(yīng)用液的配制:用時(shí)取一瓶顯色劑甲液加入一瓶顯色劑乙液中,充分混勻4℃待用,現(xiàn)用現(xiàn)配。 | |||
試劑六 | 終止劑 | 50 mL×1瓶 | 室溫保存 |
試劑七 | ATP標(biāo)準(zhǔn)品 | 粉劑×2 支 | 4℃保存 |
5mmol/L ATP標(biāo)準(zhǔn)品貯備液配制:用時(shí)加雙蒸水定容至1mL,制備5mmol/L ATP標(biāo)準(zhǔn)品貯備液。 | |||
1mmol/L ATP標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液配制:將標(biāo)準(zhǔn)品貯備液與雙蒸水1:4稀釋,即5倍稀釋。 |
產(chǎn)品說明:
三磷酸腺苷(adenosine 5'-triphosphate,ATP)是生物體內(nèi)能量轉(zhuǎn)換最基本的載體, 其含量的變化直接關(guān)系到各器官的能量代謝。ATP作為最重要的能量分子在細(xì)胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP水平的改變,會(huì)影響許多細(xì)胞的功能。通常細(xì)胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下,ATP水平會(huì)下降,而高葡萄糖刺激等對(duì)于一些細(xì)胞可以上調(diào)細(xì)胞內(nèi)ATP水平。通常ATP水平的下降表明線粒體的功能受損或下降,在細(xì)胞凋亡時(shí)ATP水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同時(shí)發(fā)生狀態(tài)。ATP含量測(cè)定試劑盒可以用于檢測(cè)紅細(xì)胞或組織內(nèi)的ATP水平。
自備儀器和用品:
分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、臺(tái)式離心機(jī)、研缽和蒸餾水。
操作步驟:
樣本前處理:
紅細(xì)胞:抗凝全血取下層積壓紅細(xì)胞,一般按1:4的體積比加雙蒸水進(jìn)行稀釋,再混勻使溶血完全,制備成溶血液。將制好的溶血液加入玻璃試管中沸水加熱煮10分鐘,取出混勻抽提1分鐘,4000轉(zhuǎn)/分鐘,離心10分鐘,取上清液待測(cè)。
組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重,按質(zhì)量(g):體積(mL)為1:9的比例加入9倍體積的沸雙蒸水,制成10%的勻漿液,再置于沸水中煮10min,取出混勻抽提1min,3500轉(zhuǎn)/分鐘,離心10min,取上清液待測(cè)。
培養(yǎng)細(xì)胞:先離心處理將細(xì)胞和培養(yǎng)上清分離,棄上清,得到下層沉淀細(xì)胞(一般細(xì)胞數(shù)量達(dá)到106 個(gè)),將收集好的細(xì)胞加入300-500μL的熱雙蒸水,置于熱水浴(90-100℃)中勻漿破碎后,將細(xì)胞懸液于沸水浴中加熱10min,取出混勻抽提1min(渦旋混勻),即可用于測(cè)定。(如果存在大塊細(xì)胞碎片,需離心后取上清測(cè)定)
注意:
1.要求不能有任何磷污染,建議*用一次性塑料試管。
2.顯色應(yīng)用液配好后,不可放置太久,一般可保存5天,*現(xiàn)配現(xiàn)用。
3.組織勻漿宜用2%-5%濃度的勻漿上清,若樣本濃度過高,則底色過深(對(duì)照管OD過高),需稀釋測(cè)定,一般通過預(yù)實(shí)驗(yàn)將對(duì)照OD值控制在1.0以下。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis》 作者:Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou, Shuiqing Liu, Maojia Zhao, Yilu Qin, Rui Chen, Yong Teng & Manran Liu 期刊:Cell Death and Disease 影響因子:5.959 PMID:30850587
《RIP3 inhibition protects locomotion function through ameliorating mitochondrial antioxidative capacity after spinal cord injury》 作者:Yang Wang,Jianhang Jiao,Shanyong Zhang,Changjun Zheng,Minfei Wu 期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy 影響因子:3.743 PMID:31146112
《Cancer-Associated Fibroblasts Accelerate Malignant Progression of Non-Small Cell Lung Cancer via Connexin 43-Formed Unidirectional Gap Junctional Intercellular Communication》 作者:Luo M,Luo Y, Mao N, Huang G, Teng C,Wang H, Wu J, Liao X, Yang J 期刊:Cellular Physiology and Biochemistry 影響因子: PMID:30453281
《AMPK Inhibition Suppresses the Malignant Phenotype of Pancreatic Cancer Cells in Part by Attenuating Aerobic Glycolysis》 作者:Mingyue Hu1, Xiangxu Chen1, Li Ma1, Yu Ma1, Yuan Li1, Huihui Song1, Jiajia Xu1, Lingna Zhou1, Xiaoxue Li1, Yuhui Jiang1, Bo Kong2,3, Peilin Huang 期刊:JOURNAL OF CANCER 影響因子:3.182 PMID:31205544