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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC1895 |
用途 | |
英文名稱 | Free cholesterol (FC) content test kit |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進口 |
簡要介紹:
FC是構(gòu)成細胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。
FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:異丙醇100mL(自備);
工作液:液體20mL×1瓶,4℃保存;
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,濃度為0.5 μ mol/mL,4℃保存。
產(chǎn)品說明:
FC是構(gòu)成細胞膜的主要成分,也是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素D等生理活性物質(zhì)的重要原料。FC濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。
FC氧化酶催化FC生成△4-膽甾烯酮和H2O2,過氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成紅色醌類化合物,在500nm有吸收峰,其顏色深淺與FC含量成正比。
自備儀器和用品:
水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品中FC提取:
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。
細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲2秒,間隔3秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
血清(漿)樣品:直接測定
測定:
分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到500 nm,蒸餾水調(diào)零。
FC工作液在40℃水浴中預(yù)熱30min。
標(biāo)準(zhǔn)管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入50μL FC標(biāo)準(zhǔn)液和150μL FC工作液,混勻,靜置24h后于500nm測定A標(biāo)準(zhǔn)管。
測定管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入50μL FC待測液和150μL FC工作液,混勻,靜置24h后于500nm測定A測定管。
三、FC含量計算:
血清(漿)中FC含量計算:
FC含量(μmol/dL)= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×100mL
=100×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)液:1μmol/mL;100 mL:1dL=100 mL。
組織中FC含量計算:
按樣本蛋白濃度計算
FC含量(μmol/mg prot)= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
=(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
按樣本鮮重計算
FC含量(μmol/g 鮮重)= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣總÷W
=(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)液:1μmol/mL;V樣總:加入提取液的體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
細胞、細菌中FC含量計算:
FC含量(μmol/104cell)=C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷細菌或細胞(104 cell/mL)
= (A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷細菌或細胞(104cell/mL)
C標(biāo)準(zhǔn)液:1μmol/mL。
注:檢測下限:0.25μmol/mL
相關(guān)文獻:
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