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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號(hào) | BC1210 |
保存條件 | 2-8℃保存 |
英文名稱 | Γ-glutamylcysteine ligase (GCL) detection kit |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:630
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字:γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶試劑盒|活性檢測試劑盒|GCL含量檢測|試劑盒|
簡要介紹:
GCL (glutamate cysteine ligase)是 GSH 合成的限速酶,GSH 對(duì) GCL 有反饋抑制作用。GCL基因表達(dá)受多種因素調(diào)節(jié),如氧化劑、抗氧化劑、生長因子和炎癥因子等。GCL活性高低對(duì)GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。
在ATP和Mg2+存在下,GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸;同時(shí)ATP去磷酸化產(chǎn)生無機(jī)磷分子,通過測定無機(jī)磷增加速率,即可計(jì)算出GCL活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體40mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加14mL蒸餾水充分震蕩溶解。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入蒸餾水3.5 mL充分震蕩溶解。
試劑四:液體16mL×1瓶,4℃保存。
試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入30mL蒸餾水,充分震蕩溶解后,緩緩加入1.0 mL濃硫酸(自備),邊加邊攪拌。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,4℃保存。1μmol/mL 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液。
產(chǎn)品說明:
GCL (glutamate cysteine ligase)是 GSH 合成的限速酶,GSH 對(duì) GCL 有反饋抑制作用。GCL基因表達(dá)受多種因素調(diào)節(jié),如氧化劑、抗氧化劑、生長因子和炎癥因子等。GCL活性高低對(duì)GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。
在ATP和Mg2+存在下,GCL催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸;同時(shí)ATP去磷酸化產(chǎn)生無機(jī)磷分子,通過測定無機(jī)磷增加速率,即可計(jì)算出GCL活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、冷凍離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL玻璃比色皿、濃硫酸和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提取:
1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體:直接測定。
二、GCL測定操作
分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到660 nm,蒸餾水調(diào)零。
將標(biāo)準(zhǔn)液稀釋10倍,即稀釋成0.1μmol/mL 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液