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產(chǎn)品名稱:：硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)活性檢測試劑盒 微量法

產(chǎn)品英文名：Micro Oxidized Thioredoxin Reductase (TrxR) Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC1155        產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣           產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：810
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字：硫氧還蛋白氧化還原酶試劑盒|活性檢測試劑盒|TrxR活性檢測|試劑盒|微量法

簡要介紹：
TrxR 是一種NADPH 依賴的包含F(xiàn)AD 結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶，屬于吡dian核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員，與硫氧還蛋白以及NADPH 共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR 與GR 活性類似，催化GSSG 還原生成GSH，是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。
    TrxR 催化NADPH 還原DTNB 生成TNB 和NADP+，TNB 在412 nm 有特征吸收峰，通過測定412nm 波長處TNB 的增加速率，即可計算TrxR 活性。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體120mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃ 避光保存。臨用前加入2mL蒸餾水溶解。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃ 避光保存。臨用前加入2mL蒸餾水溶解。
試劑四：液體×1支，-20℃避光保存。
產(chǎn)品說明：
    TrxR是一種NADPH依賴的包含FAD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶，屬于吡dian核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員，與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR與GR活性類似，催化GSSG還原生成GSH，是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。
    TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP⁺，TNB在412 nm有特征吸收峰，通過測定412nm波長處TNB的增加速率，即可計算TrxR活性。
自備儀器和用品：
    低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
1、稱約0.1g樣品，加入1mL試劑一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清液待測。
2、細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴ 個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細(xì)胞加入1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3 s，間隔7s，總時間3min），然后10000rpm，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
    測定前將上清液與試劑四以50：1的體積比混勻（即取100μL上清液加入2μL試劑四混合）37℃水浴30min后至冰上。
二、TrxR測定操作：
1. 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min后，調(diào)節(jié)波長到412nm，用蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑一在25℃（一般物種）或者37℃（哺乳動物）預(yù)熱30min。
3. 空白管：取微量玻璃比色皿或96孔板，加入20μL試劑二，20μL試劑三，160μL試劑一，迅速混勻后于412 nm測定10 s時的吸光度，37℃水浴5min迅速拿出測量412nm下的吸光度記為A1和A2。計算△A空白管=A2-A1。
4. 測定管：取微量玻璃比色皿或96孔板，加入20μL試劑二，20μL試劑三，140μL試劑一，20μL上清液，迅速混勻后于412 nm測定10 s時的吸光度，37℃水浴5min迅速拿出測量412nm下的吸光度，記為A3和A4。△A測定管=A4-A3。