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產品名稱：二胺氧化酶活性檢測試劑盒
產品英文名：Micro Protein Carbonyl Assay Kit
產品貨號：BC1280                          產地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯東U谷85A三樓
產品規(guī)格：50管/24樣                     產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：980
庫存狀態(tài)：現貨                          
關鍵字：二胺氧化酶試劑盒

簡要介紹：
DAO 催化尸胺產生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰 聯茴香胺生成氧化型鄰聯茴香胺，在 460nm 處有特征吸收峰，通過測定該波長吸光度增加 速率，計算 DAO 活性。

產品詳細描述

商品貨號：	商品品牌：	規(guī)格	基本售價：	選擇規(guī)格
BC1280-50管/24樣	Solarbio	50管/24樣	980.00元

測定意義: 
DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物（腸粘膜、肺、*、*等）、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛，其活性與核酸和蛋白合成密切相關，能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。
測定原理:
DAO 催化尸胺產生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰 聯茴香胺生成氧化型鄰聯茴香胺，在 460nm 處有特征吸收峰，通過測定該波長吸光度增加 速率，計算 DAO 活性。
自備實驗用品及儀器:
 天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、蒸餾水。

試劑組成和配制
提取液：液體 80mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 0.5mL×1 支，4℃保存。
試劑二：液體 5mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 5mL×1 瓶，4℃保存。
 
粗酶液提取
1. 組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織， 加入 1mL 提取液）進行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃離心 20min，取上清，置冰上待測。 2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建 議 500 萬細胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 10000g，4℃，離心 10min，取上清置于冰上待測。
3. 血清等液體：直接測定。

測定操作表

酶活性計算公式 

1. 按樣本蛋白濃度計算：

酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每毫克組織蛋白每分鐘催化產生 1nmol H2O2 所需的酶量為一個酶活力單位（U）。 DAO 活性（nmol/min/mg prot）= d A e ′ 460 ×V 反總÷（V 樣×Cpr）÷T= 18×A460÷Cpr

2. 按樣本質量計算：

酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每克組織每分鐘催化產生 1nmol H2O2所需 的酶量定義為一個酶活力單位。 DAO 活性（nmol/min/g）= d A e ′ 460 ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）÷T= 18×A460÷W

3. 按細胞數量計算：

酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每 104 個細胞每分鐘催化產生 1nmol H2O2 所需的酶量定義為一個酶活力單位。 DAO 活性（nmol/min/104 cell）= d A e ′ 460 ×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×細胞數量）÷T= 18×A460÷ 細胞數量
(4) 按液體體積計算
酶活性定義：在 pH7.2，溫度為 37℃條件下，每毫升血清每分鐘催化產生 1nmol H2O2 所 需的酶量定義為一個酶活力單位。 DAO 活性（nmol/min/mL）= d A e ′ 460 ×V 反總÷V 樣÷T= 18×A460 ε：氧化型鄰聯茴香胺毫摩爾消光系數：7.5 L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；
V 反總：反 應總體積，1mL；V 樣：反應中樣本體積，0.25mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr： 樣本蛋白濃度，mg/mL；T：反應時間，30min

注意事項
1、如果 OD 值小于 0.01，適當加大提取用的樣本質量； OD 值大于 0.8，粗酶液可適當稀 釋，或者減少提取用樣本量。
2、樣品蛋白質含量需要另外測定。