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產地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC2040 |
保存條件 | 2-8℃保存 |
英文名稱 | Beta-amylase test kit |
CAS編號 | |
保質期 | 1年 |
產品規(guī)格:50管/24樣 產品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:830
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關鍵字: 淀粉酶檢測試劑盒|β-淀粉酶檢測試劑盒|β-淀粉酶|試劑盒
簡要介紹:
淀粉酶負責水解淀粉,主要包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可隨機地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖。
還原糖還原 3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質。α-淀粉酶不耐酸,β-淀粉酶不耐熱。根據(jù)上述特性,鈍化其中之一,就可測出另一種淀粉酶的活力。
產品詳細描述
產品內容:
試劑一:50mL×1 瓶,常溫保存,若有黃色晶體析出,需90℃加熱溶解后再用;
試劑二:40mL×1 瓶,4℃保存。若有沉淀析出,需70℃加熱溶解后再用。
產品說明:
淀粉酶負責水解淀粉,主要包括 α-淀粉酶和 β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可隨機地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖。
還原糖還原 3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質。α-淀粉酶不耐酸,β-淀粉酶不耐熱。根據(jù)上述特性,鈍化其中之一,就可測出另一種淀粉酶的活力。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、恒溫水浴鍋、離心機、可調式移液器、玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提取:
稱取 0.1~0.2g 樣本(建議稱取約 0.1g 樣本),加入 1mL 蒸餾水,研磨勻漿;將勻漿倒入離心管中,提取液在室溫下放置提取 15min,每 5min 振蕩 1 次,使其充分提??;3000g,25℃離心 10min,取上清液加蒸餾水定容至 10 mL,搖勻,即淀粉酶原液。
吸取上述淀粉酶原液 1mL,加入 4mL 蒸餾水,搖勻,即為淀粉酶稀釋液,用于(α+β)淀粉酶總活力的測定。
二、測定步驟:
分光光度計預熱 30min 以上,調節(jié)波長到 540 nm,蒸餾水調零。
試劑一或試劑二40℃預熱10min。
測定操作表:
試劑名稱(μL) | α-淀粉酶活力測定 | 總淀粉酶活力測定 | ||
對照管 | 測定管 | 對照管 | 測定管 | |
淀粉酶原液 | 250 | 250 | ||
70℃水浴 15min 左右,冷卻 | ||||
淀粉酶稀釋液 | 250 | 250 | ||
蒸餾水 | 250 | 250 | ||
試劑二 | 250 | 250 | ||
40℃恒溫水浴中保溫5min | ||||
試劑一 | 500 | 500 | 500 | 500 |
混勻,95℃水浴5min,冷卻,在540nm 下測定吸光度,從左到右分別記為A1、A2、A3 和A4。
三、酶活性計算:
1、標準條件下測定回歸曲線為 y=3.7215x -0.1778; x 為標準品濃度(mg/mL),y 為吸光值。
2、α-淀粉酶活性
(1)按照樣本質量計算
單位定義:每 g 組織每分鐘催化產生 1mg 還原糖定義為 1 個酶活力單位。
α-淀粉酶活性(mg/min/g 鮮重)=[(A2-A1+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T
=1.075×(A2-A1+0.1778)÷W
(2)按照蛋白質含量計算
單位定義:每 mg 組織蛋白每分鐘催化產生 1mg 還原糖定義為 1 個酶活性單位。
α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= [(A2-A1+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(V 樣×Cpr)÷T
=0.1075×(A2-A1+0.1778) ÷Cpr