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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | BC1865 |
| 用途 | |
| 英文名稱 | Starch Branching Enzyme (SBE) Kit |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
| 是否進(jìn)口 |
簡(jiǎn)要介紹：
SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶，測(cè)定SBE 活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。
淀粉和碘結(jié)合后在660nm 有特征光吸收，SBE 可切斷支鏈淀粉側(cè)支，從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm 吸收值，一定時(shí)間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE 活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1支，4℃保存。臨用前每支加入1mL雙蒸水，緩慢加熱，逐漸升溫至沸騰，使其充分溶解，備用。
試劑三：液體13mL×1瓶，4℃保存；
試劑四：液體2.5mL×1瓶，4℃保存；
產(chǎn)品說(shuō)明：
SBE（EC 2.4.1.18）主要存在于植物中，是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶，測(cè)定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。
淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收，SBE可切斷支鏈淀粉側(cè)支，從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm吸收值，一定時(shí)間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水
操作步驟：
一、粗酶液提取
稱取約0.1g組織加入1mL提取液，冰浴中勻漿。15000g，4℃離心15min，取上清，置冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660 nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表
| 試劑名稱（μL） | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 |
| 煮沸1min后滅活的粗酶液 | 63 | |
| 粗酶液 | 63 | |
| 試劑一 | 80 | 80 |
| 試劑二 | 8 | 8 |
| 混勻，37℃準(zhǔn)確保溫20 min，置沸水浴中1 min終止反應(yīng)（蓋緊防止水分散失），冷卻 | ||
| 試劑三 | 124 | 124 |
| 試劑四 | 25 | 25 |
混勻，室溫靜置10min，用蒸餾水調(diào)零，660nm處讀取各管吸光值。注：若有樣品渾濁，建議離心后取上清測(cè)定。
三、SBE活力單位的計(jì)算
1、按照蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：以波長(zhǎng)660nm的吸光度下降百分率表示，每mg蛋白在1mL反應(yīng)體系中每降低1％碘藍(lán)值為一個(gè)酶活性單位。
SBE活性（U/mg prot）=（A對(duì)照管-A測(cè)定管）/A對(duì)照管×100%÷1%÷（Cpr×V樣本）×V反應(yīng)
=（A對(duì)照管-A測(cè)定管）/A對(duì)照管÷Cpr×480
2、按照樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：以波長(zhǎng)660nm的吸光度下降百分率表示，每g組織在1mL反應(yīng)體系中每降低1％碘藍(lán)值為一個(gè)酶活性單位。
SBE活性（U/g 鮮重）=（A對(duì)照管-A測(cè)定管）/A對(duì)照管×100%÷1%÷（W÷V提取×V樣本）×V反應(yīng)=（A對(duì)照管-A測(cè)定管）/A對(duì)照管÷W×480
V樣本：加入粗酶液體積，0.25mL；V提?。杭尤胩崛∫后w積，1mL；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g；V反應(yīng)：反應(yīng)體系體積，1.2mL。
注意事項(xiàng)：
1、可以在不同對(duì)照管中加入不同樣品的粗酶液，然后集中進(jìn)行1min沸水浴處理。
2、試劑一如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混勻。
相關(guān)文獻(xiàn)：
《ARSENATE INDUCED CHLOROSIS 1/ TRANSLOCON AT THE OUTER ENVOLOPE MEMBRANE OF CHLOROPLASTS 132 Protects Chloroplasts from Arsenic Toxicity 》 作者:Peitong Wang, Xi Chen, Xuan Xu, Chenni Lu, Wei Zhang, Fang-Jie Zhao 期刊:Plant physiology 影響因子:6.305 PMID:
