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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC1860 |
用途 | |
英文名稱 | Starch Branching Enzyme (SBE) Kit |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進口 |
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:1530
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 淀粉分支酶檢測試劑盒|SBE檢測試劑盒|淀粉分支酶|試劑盒
簡要介紹:
SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶,測定SBE 活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。
淀粉和碘結(jié)合后在660nm 有特征光吸收,SBE 可切斷支鏈淀粉側(cè)支,從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm 吸收值,一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE 活性。
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體25mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×2支,4℃保存。臨用前每支加入1mL雙蒸水,緩慢加熱,逐漸升溫至沸騰,使其充分溶解,備用;
試劑三:液體25mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體5mL×1瓶,4℃保存。
產(chǎn)品說明:
SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶,測定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。
淀粉和碘結(jié)合后在660nm有特征光吸收,SBE可切斷支鏈淀粉側(cè)支,從而降低了淀粉-碘復(fù)合物在660nm吸收值,一定時間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水
操作步驟:
一、粗酶液提取
稱取約0.1g組織加入1mL提取液,冰浴中勻漿。15000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。
二、測定步驟
1、分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到660 nm,蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表
試劑名稱(μL) | 對照管 | 測定管 | |
煮沸1min后滅活的粗酶液 | 250 | ||
粗酶液 | 250 | ||
試劑一 | 320 | 320 | |
試劑二 | 30 | 30 | |
混勻,37℃準(zhǔn)確保溫20 min,置沸水浴中1 min終止反應(yīng)(蓋緊防止水分散失),冷卻 | |||
試劑三 | 500 | 500 | |
試劑四 | 100 | 100 |
混勻,室溫靜置10min,用蒸餾水調(diào)零,660nm處讀取各管吸光值。注:若有樣品渾濁,建議離心后取上清測定。
三、SBE活力單位的計算
1、按照蛋白濃度計算
單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在1mL反應(yīng)體系中每降低1%碘藍值為一個酶活性單位。
SBE活性(U/mg prot)=(A對照管-A測定管)/A對照管×100%÷1%÷(Cpr×V樣本)×V反應(yīng)
=(A對照管-A測定管)/A對照管÷Cpr×480
2、按照樣本鮮重計算
單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每g組織在1mL反應(yīng)體系中每降低1%碘藍值為一個酶活性單位。
SBE活性(U/g 鮮重)=(A對照管-A測定管)/A對照管×100%÷1%÷(W÷V提取×V樣本)×V反應(yīng)=(A對照管-A測定管)/A對照管÷W×480
V樣本:加入粗酶液體積,0.25mL;V提取:加入提取液體積,1mL;Cpr:蛋白濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;V反應(yīng):反應(yīng)體系體積,1.2mL。
注意事項:
1、可以在不同對照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進行1min沸水浴處理。
2、試劑一如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混勻。
相關(guān)文獻:
《ARSENATE INDUCED CHLOROSIS 1/ TRANSLOCON AT THE OUTER ENVOLOPE MEMBRANE OF CHLOROPLASTS 132 Protects Chloroplasts from Arsenic Toxicity 》 作者:Peitong Wang, Xi Chen, Xuan Xu, Chenni Lu, Wei Zhang, Fang-Jie Zhao 期刊:Plant physiology 影響因子:6.305 PMID: