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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號(hào) | BC0615 |
用途 | |
英文名稱 | Alpha-amylase detection kit |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:860
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: α-淀粉酶檢測(cè)試劑盒|淀粉酶檢測(cè)試劑盒|α-淀粉酶|試劑盒
簡(jiǎn)要介紹:
淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機(jī)地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時(shí)使淀粉的粘度降低,因此又稱為液化酶。
還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。β-淀粉酶不耐熱,在70℃鈍化15min,從而測(cè)定α-淀粉酶活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體20mL×1瓶,室溫保存。若有黃色晶體析出,可適當(dāng)加熱溶解后再用。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入10mL蒸餾水,置于常溫水中并加熱至煮沸,期間不斷攪拌粉劑至溶解。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1支,10mg無(wú)水葡萄糖。
產(chǎn)品說(shuō)明:
淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機(jī)地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時(shí)使淀粉的粘度降低,因此又稱為液化酶。
淀粉水解酶催化淀粉水解生成還原糖,還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì),在540 nm有吸收峰;通過(guò)測(cè)定540 nm吸光度增加速率,計(jì)算淀粉酶活性。α-AL耐熱,但是β-淀粉酶可在70℃鈍化15min。因此粗酶液經(jīng)過(guò)70℃鈍化15min,就只有α-AL能夠催化淀粉水解。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板/微量比色皿、研缽和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣本,加0.8mL蒸餾水勻漿;勻漿后在室溫下放置提取15min,每隔5min振蕩1次,使其充分提??;6000g,常溫離心10min,吸取上清液并加蒸餾水定容至10 mL,搖勻,即為淀粉酶原液。
二、測(cè)定步驟和加樣表:
分光光度計(jì)或者酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm。
將葡萄糖用蒸餾水稀釋為0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078和0.0039 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
按操作表依次加入各試劑:
試劑(μL) | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 | |
α淀粉酶原液 | 75 | 75 | - | - | |
蒸餾水 | - | - | - | 75 | |
標(biāo)準(zhǔn)溶液(mg/mL) | - | - | 75 | - | |
70℃水浴15min左右,冷卻 | |||||
試劑一 | 150 | - | - | - | |
將以上對(duì)照管、測(cè)定管和試劑二置于40℃恒溫水浴中保溫10min左右 | |||||
試劑二 | 75 | 75 | 75 | 75 | |
在40℃恒溫水浴中準(zhǔn)確保溫5min | |||||
試劑一 | - | 150 | 150 | 150 |
混勻,90℃水浴10min,蒸餾水調(diào)零,540nm處讀取對(duì)照管、測(cè)定管、標(biāo)準(zhǔn)管、空白管吸光度,分別記為A對(duì)照、A測(cè)定、A標(biāo)準(zhǔn)和A空白,計(jì)算ΔA測(cè)定=A測(cè)定-A對(duì)照,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白。
相關(guān)文獻(xiàn):
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